Namipo^TM 转染试剂
Nanoscale micro poly  Transfection  Reagent
 方便   无毒   高效 

产品简介

Namipo^TM是一种高分子纳米微聚球结构转染试剂，具有生物相容性,可生物降解。特别适用于RNAi的体外转染，也可以转染高纯度的水溶质粒。Namipo转染时不需要无血清培养，抗生素无影响，不需要与培养基共同孵育，不需要换液，且具备核酸缓释和保护的功能。

产品优势

效率高一点

Namipo相对于传统的脂质体试剂，表现出更好的转染效率，克服了原代细胞的RNAi转染和部分原代细胞的质粒转染。
        
        siRNA转染原代神经元                                                               质粒转染原代成纤维

毒性小一点

转染无需换液，相对于传统质粒体，转染后24h细胞密度至少高出20%。使用Namipo转染RNAi可获得更高的干扰效率。
      
      SiRNA转染RAW264.7细胞状态                                       电镜下的Namipo
 

价格低一点

一样的使用比例下，进口试剂是我们价格的一到三倍，超高的性价比也是您选择Namipo一个合适理由。

Catalog #	TSBBR001	TSBBR003	TSBBR0015	TSBBR0075
Size	0.3 mL	1mL	1.5mL	5X1.5mL
单价 (CNY)	800	2200	3200	15000

使用方法

 

• siRNA 转染（RNAi）

RNAi Transfection
 

A.将siRNA溶于RNase-Free water ，震荡混匀配置成20μM母液，配置方法见附表一。

B.使用前请用振荡器轻微震荡5s混匀，如有少量沉淀属于正常现象，本品呈透明或乳白色均不影响产品品质。

C.根据使用量（参考附表三)将Namipo（μl)与siRNA母液（μl) 1:1混合，移液器轻轻吹打10次以上充分混匀，室温或4℃孵育10分钟。

D.按照使用量将Namipo-SiRNA复合物加入培养基，吹打5-10次混匀，或8字摇匀。转染前后培养基无需特殊处理，24小时内建议不要换液。

E.转染后检测，若所转染的siRNA带有荧光标记，可在转染12小时后直接观察荧光，观察转染效率。若siRNA不带荧光，转染24-48小时可通过qPCR检测靶基因的表达水平，由于siRNA本身就存在效率问题，为了方便判断转染是否成功，最好设置一组GAPDH的siRNA阳性对照（Namipo^TM  转染试剂试剂盒会赠送0.5nmol Fam-NC绿色荧光标记的siRNA对照）。

• 质粒转染 

Plasmid DNA Transfection
 

• 质粒制备必须去内毒素，不可用TE等buffer溶解，否则会严重影响转染效率。
• Namipo转染试剂使用前请用振荡器轻微震荡5s混匀，如有少量沉淀属于正常现象，产品呈透明或乳白色均不影响产品品质。
• 根据使用量（参考附表三)将Namipo转染试剂（μl)与无内毒素水溶质粒（μg) 1:1混合，移液器轻轻吹打5-10次充分混匀，室温或4℃孵育10分钟。
• 按照使用量将Namipo-Plasmid DNA复合物加入培养基，轻轻吹打或8字摇匀。培养基无需特殊处理，24小时内建议不要换液。
• 转染后检测，若所转染的质粒带有荧光蛋白，可在转染后24-48小时后观察荧光，观察转染效率。若质粒不带荧光，转染后24-48小时可通过qPCR或wb等方法检测转染基因的表达水平，（Namipo^TM  转染试剂试剂盒会赠送10ug 无内毒素的copGFP荧光蛋白质粒）。

 
 
备注：
附表一 配置20μM溶液用量表

摩尔量 nmol	0.5	1	2	5	10	20
溶解量（μL）	25	50	100	250	500	1000
备注；siRNA合成后一般为干粉，根据提供的nmol数参照表格配置，过程中需要 RNase-Free环境。 附表二 各种浓度siRNA用量表
孔板	100nM	50nM	30nM	20nM	10nM	每孔中总体积
96-well	0.5μL	0.25μL	0.15μL	0.1μL	0.05μL	100μL
24-well	2.5μL	1.25μL	0.75μL	0.5μL	0.25μL	500μL
12-well	5μL	2.5μL	1.5μL	1μL	0.5μL	1000μL
6-well	10μL	5μL	3μL	2μL	1μL	2000μL

备注；体积为20μM母液使用量
附表三 转染体积参考表

培养规格 皿/板	表面积 （cm2）	培养液 （μL）	D N A （μg）	Namipo （μL）	R N A i （μL）	Namipo （μL）	种板密度*（个/孔）
96 well	0.3	100μL	0.3μg	0.3μL	0.3μL	0.3μL	0.5-4 *104
24 well	2	500μL	1.5μg	1.5μL	1.5μL	1.5μL	0.5-2*105
12 well	4	1ml	3.0μg	3.0μL	3.0μL	3.0μL	1-3*105
6  well	10	2ml	6.0μg	6.0μL	6.0μL	6.0μL	2-3*105
60  mm	20	4ml	12.0μg	12.0μL	12.0μL	12.0μL	8-10*105

备注；可根据细胞转染难易程度上下调整0.3倍的使用量。推荐的siRNA 转染浓度为60nM，即表格中数值。


效果反馈

Nanop si  VB2细胞 中科院健康所
Nanop Raw264.7 siRNA 交大医学院
Nanop si A549      华西客户

文献参考


 

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W Nie, H Ge, X Yang, X Sun, H Huang, X Tao, W Chen… - Cancer letters, 2016 – Elsevier

2.Effects of BMAL1–SIRT1-positive cycle on estrogen synthesis in human ovarian granulosa cells: an implicative role of BMAL1 in PCOS

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3. Upregulation of the Non-Coding RNA OTUB1-isoform 2 Contributes to Gastric Cancer Cell Proliferation and Invasion and Predicts Poor Gastric Cancer …

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4. OTUB1 promotes tumor invasion and predicts a poor prognosis in gastric adenocarcinoma

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6.Long non-coding RNA LOC389641 promotes progression of pancreatic ductal adenocarcinoma and increases cell invasion by regulating E-cadherin in a …

S Zheng, H Chen, Y Wang, W Gao, Z Fu, Q Zhou… - Cancer letters, 2016 - Elsevier

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H Liu, H Shi, Q Fan, X Sun - Tumor Biology, 2016 - Springer

8.Dynamic quantitative proteomics characterization of TNF-α-induced necroptosis

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9.Inhibition of cyclooxygenase-2 alleviates liver cirrhosis via improvement of the dysfunctional gut-liver axis in rats

JH Gao, SL Wen, H Tong, CH Wang… - American Journal of …, 2016 - Am Physiological Soc

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11. CXCL12/CXCR4 Axis Regulates Aggrecanase Activation and Cartilage Degradation in a Post-Traumatic Osteoarthritis Rat Model

W Lu, J Shi, J Zhang, Z Lv, F Guo, H Huang… - International Journal of …, 2016 - mdpi.com
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