| 导读 | Lenti-TSB™ 慢病毒包装试剂盒Transheep的的Lenti-TSB™ 表达包装系统包括优化的慢病毒包装质粒 |
| Lenti-TSB™ 慢病毒包装试剂盒 | |||||
| Transheep的的Lenti-TSB™ 表达包装系统包括优化的慢病毒包装质粒，有多种Tag及启动子可供选择copGFP阳性对照质粒，Namipo-T新型转染试剂等。该系统与的Transheep的ORF、shRNA克隆配套使用保证更高滴度和更高表达水平，同时为您降低可观的实验成本。 | |||||
| 内容 | 价格 | ||||
| 慢病毒空载 | 丰富的载体可供选择，包括不同的荧光、抗性、启动子 | 800元起 | |||
| 模版合成 | 如果您没有目的基因的模版，我们可以帮您合成任意序列并克隆到您选定的载体 | 低至1元/bp | |||
| 载体构建 | 构建任意您感兴趣的基因到您选择的载体，包括LncRNA等，最大容量为6kb | 800元起 | |||
| 表达检测 | 构建好的载体少量抽提，转染工具细胞进行目的基因表达检测，保证您收到的载体可高效表达 | 500元起 | |||
| 包装体系 | 经过优化的高纯度包装质粒体系，按推荐比例与穿梭质粒混合即可 | 500元起 | |||
| 质粒抽提 | 去内毒素高纯度质粒是慢病毒包装的必备条件，Transheep可提供质粒制备及专用的抽提试剂盒 | 500元起 | |||
| 转染试剂 | Namipo-T™ ，纳米材料293t专用新型转染试剂，效率可达90%以上，几乎无毒，更利于出毒 | 800元起 | |||
| 包装及滴度检测 | 提供包装好的纯化慢病毒，保证滴度达到要求 | 2000元起 | |||
| 实验流程 | |||||
| 构建目的基因的慢病毒载体，制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒，分别进行高纯度无内毒素抽提，使用Namipo-T共转染 293T 细胞，培养 48和 72h 后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。 | |||||
| 实验材料 | |||||
| （1）慢病毒载体、包装细胞和菌株 | |||||
| Transheep的的Lenti-TSB™ 表达包装系统，可根据您的需求现在最适合的表达载体，多种启动子可选，CMV、PGK 启动子在常规肿瘤细胞有极高的表达能力，而 MSVC、EF1 启动子则可满足干细胞中过表达基因的需求。Puro、Neo、 抗性，copGFP、tRFP、Luc 等多种抗性基因与荧光标记的选择搭配。 可实现多种基因的共转化。出更高的出毒效率。 |
|||||
| 货号 | 类别 | 载体名称 | 荧光标记 | 抗性 | 蛋白标签 |
| TSE01 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-3flag-EF1-copGFP | 绿色 | 无 | Flag |
| TSE02 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-3flag-EF1-copGFP-F2A-Puro | 绿色 | Puro | Flag |
| TSE03 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-3flag-EF1-tRFP-F2A-Puro | 红色 | Puro | Flag |
| TSE04 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-3flag-EF1-copGFP-F2A-Neo | 绿色 | Neo | Flag |
| TSE05 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-3flag-EF1-tRFP-F2A-Neo | 红色 | Neo | Flag |
| TSE06 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-EF1-Puro | 无 | Puro | 无 |
| TSE07 | 慢病毒OE | pTSBOE-CMV-MSC-IRES-Neo | 无 | Neo | 无 |
| TSE08 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-ZsGreem-PGK-Puro | 绿色 | Puro | |
| TSE09 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-ZsGreem-PGK-Neo | 绿色 | Puro | |
| TSE10 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-tRFP-PGK-Puro | 红色 | Neo | |
| TSE11 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-tRFP-Neo | 红色 | Neo | |
| TSE12 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-Neo | 无 | Neo | |
| TSE13 | 慢病毒SH | pTSBSH-U6-MSC-CMV-Puro | 无 | Puro | |
| TSE14 | 慢病毒SH | pTSBSH-H1-MSC-FE1-Puro-copGFP | 绿色 | Puro | |
| TGL004 | 慢病毒 | pTsLVGL-MCS-Minp-Luc2-EF1-Puro | LUC2 | Puro | 转录因子、启动子验证 |
| TGL005 | 慢病毒 | pTsLVGL-CMV-Luc2-EF1-Puro | LUC2 | Puro | UTR验证，启动子验证 |
| （2） 包装体系 | |||||
| Transheep的 packing mix是我们经过优化过的包装体系，可以按照穿梭质粒与包装体系（1＋基因大小kb）/1的比例混合即可，Lenti-TSB™也可以使用通用的包装细胞进行包装。 | |||||
| （3）菌株大肠杆菌菌株 | |||||
| 推荐使用top10作为质粒扩增及构建的菌株。如果基因复杂可考虑使用stbl3菌株，保真度要高一些，正常情况下使用top10引起载体突变的概率不大。 | |||||
| （4）包装细胞 | |||||
| TSB-293Tmax™ 细胞系转染效率高，能够实现病毒蛋白高水平的表达，表现出更高的出毒效率。 | |||||
| （5）试剂耗材 | |||||
| 慢病毒包装所用的质粒必须去内毒素处理，培养耗材及血清也是影响慢病毒出毒的一大因素，市场上的试剂假冒产品较多，可咨询客户购买适合包装所用的相关产品。 | |||||
| 实验流程 | |||||
| 请参考TSB慢病毒包装试剂盒使用说明 | |||||
| 参考文献 | |||||
| The antihelminthic drug niclosamide effectively inhibits the malignant phenotypes of uveal melanoma in vitro and in vivo；Theranostics. 2017; 7(6): 1447–1462. Published online 2017 Apr 3. doi: 10.7150/thno.17451 |
|||||
| USP19 suppresses cellular type I interferon signaling by targeting TRAF3 for deubiquitination；Published Online:10 Apr 2017https://doi.org/10.2217/fmb-2017-0006 | |||||
| Upregulation of the Non-Coding RNA OTUB1-isoform 2 Contributes to Gastric Cancer Cell Proliferation and Invasion and Predicts Poor Gastric Cancer Prognosis；Int J Biol Sci. 2016; 12(5): 545–557. Published online 2016 Mar 3. doi: 10.7150/ijbs.13540 |
|||||
| Pristimerin effectively inhibits the malignant phenotypes of uveal melanoma cells by targeting NF‑κB pathway；Published online on: July 25, 2017 https://doi.org/10.3892/ijo.2017.4079 | |||||
| Multifunctional nanoparticles for co-delivery of paclitaxel and carboplatin against ovarian cancer by inactivating the JMJD3-HER2 axis；The article was received on 21 Jun 2017, accepted on 31 Jul 2017 and first published on 03 Aug 2017 | |||||
| Long non-coding RNA LOC389641 promotes progression of pancreatic ductal adenocarcinoma and increases cell invasion by regulating E-cadherin in a TNFRSF10A-related manner；https://doi.org/10.1016/j.canlet.2015.12.010 | |||||