🧬 shRNA（短发夹RNA）概述
shRNA 是通过转录后折叠成发夹结构的 RNA 分子，由细胞内 Dicer 酶切割产生功能性 siRNA。本工具基于 Target Seq（21 bp）和选择的载体框架自动生成 shRNA 序列。
📐 shRNA 发夹结构
shRNA 前体结构：
5'-(正义链 21 bp)-loop-(反义链 21 bp)-TTTTT-3'
loop = CTCGAG 或 TTCAAGAGA（发夹环）；TTTTT = Pol III 终止信号
⚙️ 作用机制
- shRNA 表达载体转染/转导细胞
- 细胞内转录产生 shRNA 前体
- Drosha-DGCR8 复合物处理为 pre-shRNA
- Exportin-5 介导出核
- Dicer 酶切割去除发夹环，产生成熟 siRNA
- siRNA 装载到 RISC，引导靶 mRNA 降解
🧪 实验验证建议
- 建议设立非靶向对照（scramble shRNA）。
- 建议通过 qPCR 或 Western blot 验证敲低效率（48–96h 后）。
- 载体和交付形式统一在基因结果下方的产品方案区选择。