分子工具 + 基因载体一体化
权阳生物
GENE VECTOR SERVICE

CRISPR 文库

适合全基因组或定制基因集合的高通量筛选。 分子设计完成后进入载体落地,从“设计方案”走到“可执行实验材料”。

高通量筛选定制文库慢病毒文库NGS 分析

CRISPR 文库是什么

CRISPR 文库通过大量 sgRNA 同时覆盖多个基因或位点,用于正筛、负筛、药物敏感性筛选和功能基因发现。它把单基因设计扩展为高通量功能筛选。

CRISPR 文库系统

  • sgRNA 文库:全基因组、通路集合或定制基因集。
  • 载体骨架:通常为慢病毒文库载体,支持筛选标记。
  • 细胞系统:Cas9 稳转细胞或一体化 Cas9-sgRNA 系统。
  • 测序分析:筛选前后 sgRNA 丰度变化用于命中基因分析。

文库流程

  1. 1确定筛选目标、细胞模型、文库范围和筛选压力。
  2. 2设计或选择 sgRNA 文库并完成合成克隆。
  3. 3进行文库质粒扩增和慢病毒包装。
  4. 4按覆盖度感染细胞并执行筛选实验。
  5. 5NGS 测序和富集/耗竭分析,输出候选基因列表。
经典应用案例

把筛选问题压缩成一条实验路径

这里不再放大图占位,而是用页面原生流程展示:先定义表型,再选择文库、施加筛选压力,最后用 NGS 找到候选基因;下方用 4 条案例补充文献背书。

确定表型

药物耐受、增殖、免疫杀伤或荧光 reporter。

选择文库

全基因组、通路集合或定制基因集。

文库感染

控制 MOI 与覆盖度,保留 sgRNA 复杂度。

筛选压力

加药、分选、共培养或时间维度负筛。

NGS 命中

分析富集/耗竭 sgRNA,输出候选基因。

01

药物耐受 / 敏感性筛选

加药压力下比较 sgRNA 富集/耗竭,定位耐药或增敏通路。

Liao 2021 · 药物耐受
02

必需基因与增殖筛选

负筛找影响存活、增殖、克隆形成的核心基因。

Shalem 2014 · 全基因组 KO
03

免疫逃逸 / 表面标志物筛选

结合共培养、FACS 或体内压力,筛选免疫识别与杀伤相关基因。

Manguso 2017 · 免疫治疗靶点
04

报告基因 / 表型分选筛选

把荧光、抗原染色或功能读出转成可分选信号。

Zhang 2016 · 表型读出

快速加入项目草稿

如果已有筛选方向,可先把“CRISPR 文库”加入项目草稿。技术支持会继续确认文库类型、细胞模型、筛选压力、覆盖度、测序深度和数据分析口径。

查看草稿